Q8同一個樣品檢測兩次，檢測值差異較大，可能是由于什么原因?qū)е碌模?/div>
答：正常情況下,板孔間的變異不會對樣本的檢測結(jié)果造成影響，可能造成此結(jié)果的情況有：
①某一實驗操作前處理發(fā)生污染或失誤（稱樣量、添加樣品提取液或有機溶劑的量不準確，渦動離心提取上層清液時混入大量雜質(zhì)）；
②某一實驗檢測分析過程出現(xiàn)失誤（添加樣品的量，酶或抗體的量，添加AB液或終止液的量不準）。
Q9藥殘檢測時，樣品前處理過程中所用氮氣可否用壓縮空氣代替？
答：一般情況下，需要檢測的目標物是比較穩(wěn)定的藥物，可以用壓縮空氣代替氮氣。如有特殊藥物可能發(fā)生氧化影響檢測結(jié)果，則不可以使用壓縮空氣，具體藥物可向廠家咨詢。
Q10添加回收率實驗中添加濃度如何選擇？
答：添加回收率是驗證整個實驗過程準確度的指標之一。添加濃度的選擇盡量避免在zui低檢測限以內(nèi)或者超出試劑盒曲線外的濃度，建議參照目標藥物在相應樣品中的判定限、定量限或曲線中間范圍濃度。同時，需根據(jù)具體的添加濃度對所用高標進行適當?shù)南♂專ＷC添加量的準確性。
添加回收的體積公式:V=C*1000M/P
其中:V為添加的高標體積（μl），C為添加的濃度(ppb)，P為高標的濃度(ppb)，M為樣本的質(zhì)量(g)。
Q11樣本的吸光度值為什么會超出曲線上zui大ＯＤ值？
答：①標準品回溫時間不夠；
?、跇颖局泻蟹菢颖净|(zhì)的物質(zhì)，如有機溶劑；
?、蹣颖緩腿芤合♂屽e誤或直接用去離子水作為復溶液；
?、芰銟似繁晃廴荆?/div>
?、莘磻獣r間錯誤；
樣本的抑制率在100%-120%范圍內(nèi)，一般可以初步判斷樣本為陰性。若大部分樣本的抑制率遠超過120%，建議咨詢或重復實驗。
Q12吹干步驟為什么選擇水浴或金屬浴?
答：有機溶劑的沸點一般在60-90℃不等，為加快有機試劑的揮發(fā)，選擇水浴加熱或金屬浴加熱。加熱溫度應根據(jù)待測化合物的性質(zhì)與提取試劑的沸點來確定，若待測化合物熱穩(wěn)定性好，不易降解或變性，可適當提高氮吹溫度。建議使用說明書中給出的溫度。
Q13回收率能否驗證實驗過程及數(shù)據(jù)的準確性？
答：一般用質(zhì)控樣品（已知濃度的樣品）的實驗結(jié)果來反映檢測的準確性。在沒有質(zhì)控樣本對照的情況下，空白樣本添加回收率是對操作準確性、操作環(huán)境及分析試劑的評價指標之一。因此，回收率也是實驗成功與否的一個重要判定依據(jù)。
在ELISA檢測方法實際應用過程中，回收率只是一個參考指標，其值只要穩(wěn)定在一定范圍內(nèi)，檢測結(jié)果即具有參考性。
Q14同一個樣品，*次檢測顯示強陽性，第二次檢測時卻顯示陰性，什么原因？
答：①點樣的過程中出現(xiàn)跳孔；
?、诎蹇壮霈F(xiàn)較大的變異系數(shù)；
?、蹣颖驹谇疤幚磉^程中被污染；
?、軜颖净旌喜痪鶆?。
建議出現(xiàn)高陽性樣本時應保留該樣本液，與重新處理好的樣本液一起點樣分析。
Q15同檢測結(jié)果出現(xiàn)陽性應該怎么處理？
答：應及時進行復檢工作。若檢測結(jié)果存在大面積陽性，應首先查找原因，并及時復檢。若復檢結(jié)果仍為陽性應及時保存該樣本，并使用儀器進行確證；如復檢為陰性，則極大可能*次實驗中存在污染或其他失誤導致假陽性。
Q16冬天實驗室溫度過低可否將試劑盒置于室溫保存？
答：不可以。冬天晝夜溫差的改變也會對試劑盒的性能造成不可逆的傷害，應嚴格按照說明書規(guī)定保存。
Q17實驗結(jié)果出現(xiàn)白板如何排查問題？
答：出現(xiàn)該問題時要分情況解決：
1.標準曲線顯色正常，樣本均為陽性：證明試劑盒性能正常，樣本遭到大面積污染或前處理過程出現(xiàn)重大失誤，建議重新取樣做復檢。
2.整板均不顯色或OD值很低：考慮酶和抗體取用錯誤，點板過程過程中的污染（尤其是洗板過程）或廠家技術(shù)人員協(xié)助找到原因。
更新時間：2018-05-11 
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